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HRP-Streptavidin|辣根過氧化物酶-鏈霉親和素的描述

2024-09-02 [339]


HRP-Streptavidin|辣根過氧化物酶-鏈霉親和素

辣根過氧化物酶 - 鏈霉親和素(HRP-Streptavidin)是一種具有特定功能的復(fù)合物。

一、分子結(jié)構(gòu)特點

辣根過氧化物酶(HRP)部分:

HRP 是一種含血紅素的糖蛋白,由多個亞基組成。其活性中心含有一個鐵卟啉結(jié)構(gòu),能夠催化過氧化氫(H?O?)對底物的氧化反應(yīng)。

HRP 具有較高的催化活性和穩(wěn)定性,在生物化學(xué)和免疫分析等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用。

鏈霉親和素部分:

鏈霉親和素是一種由鏈霉菌分泌的蛋白質(zhì),對生物素具有較高的親和力。它由四個相同的亞基組成,每個亞基都能結(jié)合一個生物素分子。

鏈霉親和素具有很強的特異性結(jié)合能力和穩(wěn)定性,常用于生物標(biāo)記、檢測和分離等領(lǐng)域。

二、物理性質(zhì)

外觀:通常為淡黃色或棕色粉末。

溶解性:可溶解于適當(dāng)?shù)木彌_液中,如磷酸鹽緩沖液(PBS)等。

三、化學(xué)性質(zhì)

酶催化活性:HRP 能夠催化 H?O? 對多種底物的氧化反應(yīng),產(chǎn)生有色或發(fā)光產(chǎn)物。常用的底物包括鄰苯二胺(OPD)、四甲基聯(lián)苯胺(TMB)等。

生物素結(jié)合能力:鏈霉親和素與生物素之間的結(jié)合具有較高的親和力和特異性。這種結(jié)合不受大多數(shù)化學(xué)和物理因素的影響,非常穩(wěn)定。

四、應(yīng)用領(lǐng)域

免疫分析:

HRP-Streptavidin 可用于酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)、免疫組織化學(xué)(IHC)、免疫印跡(Western blot)等免疫分析技術(shù)中。

在這些技術(shù)中,生物素標(biāo)記的抗體或其他生物分子與 HRP-Streptavidin 結(jié)合,通過 HRP 的催化作用產(chǎn)生可檢測的信號,從而實現(xiàn)對目標(biāo)分子的檢測和定量分析。

核酸檢測:

HRP-Streptavidin 可用于核酸雜交、原位雜交等核酸檢測技術(shù)中。生物素標(biāo)記的核酸探針與目標(biāo)核酸雜交后,與 HRP-Streptavidin 結(jié)合,通過 HRP 的催化作用產(chǎn)生信號,實現(xiàn)對目標(biāo)核酸的檢測。

生物標(biāo)記和分離:

HRP-Streptavidin 可用于生物分子的標(biāo)記和分離。生物素標(biāo)記的生物分子與 HRP-Streptavidin 結(jié)合后,可以通過酶催化反應(yīng)產(chǎn)生信號進(jìn)行檢測,或者利用鏈霉親和素與生物素的高親和力進(jìn)行分離純化。

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