膽鈣化醇-過(guò)氧化物酶標(biāo)記物的制備方法主要有以下幾種：

過(guò)碘酸鹽氧化法

• 原理：過(guò)碘酸鈉將辣根過(guò)氧化物酶（HRP）分子表面的多糖氧化為醛基，醛基與膽鈣化醇分子上的氨基形成Schiff堿而結(jié)合，后者可進(jìn)一步用NaBH?（或乙醇胺）還原生成穩(wěn)定的酶標(biāo)記物。

• 操作步驟：

• 將HRP溶解在適量的緩沖溶液中，加入過(guò)碘酸鈉溶液，在一定溫度下避光反應(yīng)一段時(shí)間，使HRP表面的多糖被氧化為醛基。

• 將膽鈣化醇溶解在合適的有機(jī)溶劑中，加入到上述氧化后的HRP溶液中，在堿性條件下反應(yīng)，使醛基與膽鈣化醇的氨基形成Schiff堿。

• 加入NaBH?溶液，在一定溫度下反應(yīng)一段時(shí)間，將Schiff堿還原為穩(wěn)定的共價(jià)鍵，得到膽鈣化醇-過(guò)氧化物酶標(biāo)記物。

• 對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行透析或超濾等純化操作，去除未反應(yīng)的小分子物質(zhì)，得到純化的標(biāo)記物。

戊二醛交聯(lián)法

• 原理：戊二醛作為雙功能交聯(lián)劑，可與HRP和膽鈣化醇分子上的氨基反應(yīng)，形成穩(wěn)定的交聯(lián)產(chǎn)物。

• 操作步驟：

• 將HRP和膽鈣化醇分別溶解在適當(dāng)?shù)木彌_溶液中。

• 向HRP溶液中加入適量的戊二醛溶液，在一定溫度下反應(yīng)一段時(shí)間，使HRP分子上的氨基與戊二醛的醛基反應(yīng)。

• 將上述反應(yīng)液與膽鈣化醇溶液混合，在一定溫度下繼續(xù)反應(yīng)，使戊二醛的另一個(gè)醛基與膽鈣化醇分子上的氨基反應(yīng)，形成交聯(lián)產(chǎn)物。

• 對(duì)反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行透析或超濾等純化操作，去除未反應(yīng)的戊二醛和其他小分子物質(zhì)，得到純化的膽鈣化醇-過(guò)氧化物酶標(biāo)記物。

其他方法

• 直接偶聯(lián)法：利用某些化學(xué)試劑或酶促反應(yīng)，將膽鈣化醇直接與HRP進(jìn)行偶聯(lián)。例如，使用N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS）等活化試劑，將膽鈣化醇活化后與HRP分子上的氨基反應(yīng)，形成穩(wěn)定的偶聯(lián)物。

• 間接偶聯(lián)法：通過(guò)引入中間連接分子，如生物素-親和素系統(tǒng)，將膽鈣化醇與HRP間接偶聯(lián)。首先將膽鈣化醇與生物素結(jié)合，然后利用親和素與生物素的特異性結(jié)合，將親和素標(biāo)記的HRP與生物素化的膽鈣化醇結(jié)合，形成標(biāo)記物。

關(guān)于我們:

陜西星貝愛(ài)科生物科技經(jīng)營(yíng)的產(chǎn)品種類包括有：合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、磁性納米顆粒、納米金及納米金棒、近紅外熒光染料、活性熒光染料、熒光標(biāo)記物、蛋白交聯(lián)劑、小分子PEG衍生物、點(diǎn)擊化學(xué)產(chǎn)品、樹(shù)枝狀聚合物、環(huán)糊精衍生物、大環(huán)配體類、熒光量子點(diǎn)、透明質(zhì)酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳納米管、富勒烯，二氧化硅及介孔二氧化硅，聚合物微球，近紅外熒光染料，聚苯乙烯微球，上轉(zhuǎn)換納米發(fā)光顆粒，MRI核磁造影產(chǎn)品，熒光蛋白及熒光探針等等。

溫馨提示：供應(yīng)產(chǎn)品僅用于科研，不能用于人體！

相關(guān)產(chǎn)品：

FA-HSA-Cy5.5，葉酸-人血清白蛋白Cy5.5標(biāo)記物，F(xiàn)olic Acid-HSA-Cy5.5 Conjugate

FA-BSA-Cy5.5，葉酸-牛血清白蛋白Cy5.5標(biāo)記物，F(xiàn)olic Acid-BSA-Cy5.5 Conjugate

FA-Cy5.5，葉酸花青染料5.5標(biāo)記物，F(xiàn)olic Acid-Cyanine 5.5 Conjugate

FA-Cy5，葉酸花青染料5標(biāo)記物，F(xiàn)olic Acid-Cyanine 5 Conjugate

半乳糖化人血清白蛋白，Galactose-HSA Conjugate

半乳糖化聚賴氨酸，Galactose-Poly-lysine conjugate，G-PLL

雌三醇-過(guò)氧化物酶標(biāo)記物Estriol-HRP Conjugate，E3-HRP

雌三醇-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物Estriol-OVA Conjugate，E3-OVA

雌三醇-牛血清白蛋白偶聯(lián)物Estriol-BSA Conjugate，E3-BSA

新霉素-過(guò)氧化物酶標(biāo)記物Neomycin-HRP Conjugate

新霉素-雞卵清白蛋白偶聯(lián)物Neomycin-OVA Conjugate